IDENTIFIKASI MUTASI HETEROPLASMI A3243G DNA MITOKONDRIA DAN STUDI PEWARISAN MATERNAL PADA PASIEN DIABETES MELITUS TIPE 2
ABSTRAK: Mutasi A3243G DNA
mitokondria (mtDNA) adalah mutasi subsitusi basa A ke G pada posisi 3243 gen
tRNALeu. Salah satu fenotipe klinis yang disebabkan mutasi A3243G mtDNA adalah
MIDD (Maternally Inherited Diabetes and Deafness) yang merupakan salah satu
bentuk diabetes melitus (DM) tipe 2. Penelitian ini bertujuan untuk
mengidentifikasi mutasi heteroplasmi A3243G manusia Indonesia pada pasien DM
tipe 2 dan mempelajari pewarisan maternal mutasi A3243G hingga tiga generasi
dengan memanfaatkan metode PCRRFLP (Polymerase Chain Reaction–Restriction
Fragments Length Polymorphism), PASA (PCR-Amplification of Specific Allelle)
dan PCR-SSCP (PCR-Single Strand Conformation Polymorphism). mtDNA diperoleh
dari hasil lisis sampel darah. Hasil penelitian menunjukkan bahwa mutasi A3243G
teridentifikasi pada 2 dari 101 pasien DM tipe 2. Mutasi heteroplasmi A3243G
dapat ditunjukkan dari hasil PCR-RFLP dan PASA. Hasil RFLP menunjukkan adanya
tiga fragmen, masing-masing yaitu fragmen utuh 294, 182 dan 112 pb sebagai hasil
restriksi enzim ApaI. Hasil PASA menunjukkan adanya dua fragmen dengan ukuran
200 pb pada alel normal dan mutan. Mutasi A3243G yang teridentifikasi mempunyai
tingkat heteroplasmi yang rendah karena tidak dapat teridentifikasi dengan
direct sequencing dan PCR-SSCP (akrilamid:bis-akrilamid 49:1%). Pewarisan
maternal mutasi heteroplasmi A3243G dapat teridentifikasi dengan PASA.
Penulis: Iman P. Maksum,
Sriwidodo, O. Suprijana, G. Natadisastra, S. Nuswantara & A.S. Noer
Kode Jurnal: jpbiologidd100029
