Metode Kromatograf Cair Kinerja Tinggi Menggunakan Kolom Oktil Silika Fully Endcapped Residual Silanol pada Pemisahan Kotinin dan 3-Hidroksikotinin dalam Sampel Urin
Abstrak: Kotinin (COT) dan
3-hidroksikotinin (3-HCOT) merupakan metabolit nikotin yang dikeluarkan melalui
urin. Perubahan nikotin menjadi COT dan 3-HCOT diperantarai oleh enzim sitokrom
P450 2A6 (CYP 2A6). Akitivitas enzim ini dapat diprediksi dari nilai rasio
kadar 3-HCOTterhadap COT. Oleh karena itu nilai rasio 3-HCOT terhadap COT
banyak digunakan pada studi fenotipe dan polimorfsme enzim tersebut. Pada
penelitian ini, isolasi COT dan 3-HCOT dari sampel urin dilakukan dengan teknik
isolasi cair-cair secara bertingkat. Analisis simultan COT dan 3-HCOT dilakukan
dengan metode Kromatograf Cair Kinerja Tinggi (KCKT) fase terbalik menggunakan
kolom oktil silika (C8; Shimadzu 250×4,6 mm, 5µm) fully endcapped residual
silanol. Larutan standar internal (SI) yang digunakan adalah asetanilid. Sistem
fase gerak yang dapat memisahkan COT, 3-HCOT danSI adalah campuran metanol :
amonium asetat 5mM (50:50) pada kecepatan alir 0,8 mL/menit. Nilai waktu
retensi (tR) ketiga senyawa kurang dari 10 menit, dengan nilai peak tailing
factor (tf) kurang dari 2. Nilai resolusi (Rs) 3-HCOT terhadap COT adalah 2,67,
sedangkan nilai Rs COT terhadap SI adalah 8,84.
Penulis: CHRISTINE PATRAMURTI,
SUDIBYO MARTONO, SUGIYANTO, ARIEF NURROCHMAD
Kode Jurnal: jpfarmasidd140307